液相色譜拖尾峰如何解決,一篇文章幫您解讀?

          在日常的液相色譜分析過程中，我們常常遇到色譜峰拖尾的現(xiàn)象。那今天我們就來學(xué)習(xí)下，拖尾峰出現(xiàn)的緣由以及該如何改善拖尾現(xiàn)象。下圖是一張典型的拖尾峰色譜圖，我們來好好的分析分析它吧！

拖尾峰的影響？

1.影響峰高的計(jì)算

峰面積相同情況下，由于峰拖尾，它們的峰高會相差很多。當(dāng)我們使用峰高來計(jì)算樣品結(jié)果時(shí)就產(chǎn)生影響，尤其是計(jì)算最低檢出限時(shí)會比較明顯。

2. 影響峰面積的計(jì)算

當(dāng)計(jì)算峰面積時(shí)，峰的起點(diǎn)和終點(diǎn)通一般通過色譜峰的斜率來確定。色譜峰拖尾，它的尾部基線越平緩終點(diǎn)就越難確認(rèn)，導(dǎo)致峰面積定量不準(zhǔn)。

3.影響對某些痕量組分的確認(rèn) 

當(dāng)前面的峰分離度不是很好時(shí)，樣品峰就會容易被隱藏在前面峰的拖尾處從而無法計(jì)算。

  拖尾峰原因分析及解決方案 

          ①柱過載

          當(dāng)樣品量過多時(shí)會出現(xiàn)超載現(xiàn)象，包括質(zhì)量過載和體積過載。

          可通過降低樣品量或者增加柱直徑，采用較高容量的固定相來解決。

          ②峰干擾

          其他雜峰的出現(xiàn)也會導(dǎo)致拖尾峰。

          可通過增加樣品凈化程序,減少干擾。也可通過調(diào)整流動相提高分離度來解決問題。 

         ③硅羥基作用

         大多數(shù)情況我們都會用到反相色譜。以常用的C18柱為例，C18是被鍵合在載體硅膠表面的，理想的狀態(tài)是流動相中的樣品只和固定相C18發(fā)生作用，而實(shí)際上一半以上的硅膠表面并沒有被鍵合上C18,所以硅膠表面會裸露出大量的硅羥基（Si-OH）。而單獨(dú)的自由的硅羥基會和流動相中的樣品發(fā)生作用，形成拖尾。

        ④當(dāng)樣品中出現(xiàn)了堿性化合物，堿性基團(tuán)更容易與色譜柱中的硅羥基發(fā)生作用形成拖尾峰。

        在最近的十幾年中，色譜柱主要以高純度的硅膠為載體，從而使得硅膠表面盡可能減少自由的硅羥基。用來減少拖尾峰的產(chǎn)生。那么對于過去的自由硅羥基較多的色譜柱可加三乙胺,與硅醇基作用鈍化色譜柱。對硅膠載體為主的新型色譜柱，可增加緩沖液或鹽的濃度來降低流動相PH值,純化樣品來抑制硅膠的離子化，從而達(dá)到改善拖尾的效果。

       ⑤柱塌陷或形成短路通道

色譜柱經(jīng)過較高的壓力后，柱頭會發(fā)生塌陷。這種塌陷是不可逆轉(zhuǎn)的，我們只能直接更換色譜柱。

       ⑥死體積或柱外體積過大

接頭不合適就會產(chǎn)生死體積，死體積或柱外體積過大，就會導(dǎo)致樣品在死體積處發(fā)生了滯留和擴(kuò)散。這時(shí)一般建議在液相色譜中正確安裝并且使用與您的儀器匹配的管線接頭，以減少死體積的產(chǎn)生。

       ⑦柱效下降

當(dāng)色譜柱經(jīng)歷過高溫，強(qiáng)酸，或者一些極端使用方法導(dǎo)致固定相流失較多后，色譜柱中的自由硅羥基也會變得越來越多，從而更加容易造成拖尾峰。

另外，色譜柱在長時(shí)間使用特別是純水經(jīng)過反相柱之后固定相易流失，或折疊，也會導(dǎo)致柱效降低的情況。在沖洗色譜柱無法復(fù)原后，建議直接更換色譜柱。為延長柱壽命也可增加保護(hù)柱。